MAPA
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ISSN 1517-4964
Dezembro, 2009
Passo Fundo, RS


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Fig. 6. Hibridização genômica in situ: tratamento das lâminas. (A) Identificação da área na lâmina contendo material a ser hibridizado. (B) Imersão das lâminas em álcool etílico absoluto:ácido acético glacial (3:1, v/v), seguido de etanol 70% e 100%. (C) Secagem das lâminas de modo inclinado em estufa 50-60 °C. (D) Lâminas em temperatura ambiente. (E) Tratamento das lâminas com RNase. (F) Incubação das lâminas em câmara úmida a 37 °C. (G) Imersão das lâminas em 2x SSC para retirada da RNase. (H) Adição de HCl 10 mM para preparação das lâminas para tratamento com pepsina. (I) Tratamento com pepsina. (J) Incubação das lâminas em câmara úmida a 37 °C. (K) Lavagem das lâminas em 2x SSC. (L) Tratamento das lâminas em paraformaldeído e lavagem em 2x SSC. (M) Retirada do excesso de 2x SSC em papel absorvente. (N) Desidratação do material em série etílica (70% e 100%). (O) Secagem das lâminas de modo inclinado (Fonte: Embrapa Trigo; Departamento de Genética, UFPE).


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